Page 264 - Libro Hipertextos Quimica 2
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PRÁCTICA                             ME APROXIMO AL CONOCIMIENTO
                            DE LABORATORIO                         COMO CIENTÍFICO NATURAL



                  ¿Cómo extraer el ADN?


                    En 1977, se descubrió un método para determinar la secuencia de bases nitrogenadas en cadenas de
                    ADN. El primer paso en esta investigación fue aislar el ADN, para luego estudiar su composición. En
                    esta práctica aplicaremos un procedimiento para aislar el ADN de una muestra de hígado de pollo.

                    Conocimientos previos
                    Ácidos nucleicos: ADN y ARN.




                                                     Experimento 1
                     Reactivos
                     ■  10 g de hígado de pollo
                                                   Procedimiento
                     ■  Agua destilada
                                                1.  Mezcla en la licuadora 10 g de hígado con 50 mL de agua destilada.
                     ■  Solución de NaCl 2 M
                                                2.  Filtra varias veces la mezcla anterior, y adiciona un volumen igual de
                     ■ Dodecil-hidrogenio-         solución de cloruro de sodio al fi ltrado.
                       sulfato sódico, SDS
                                                3.  Agrega 1 mL de SDS o 1 mL de detergente líquido de uso doméstico.
                     ■  Detergente líquido para    Agita suavemente y observa los resultados.
                       vajilla
                                                4.  Adiciona 50 mL de alcohol etílico. Observa la interfase donde se en-
                     ■  Colorante naranja de       cuentra el ADN.
                       acridina
                                                5.  Introduce un agitador y remueve en la misma dirección. Observa
                     ■  Alcohol etílico
                                                   cómo se van adhiriendo al agitador unas fi bras blancas, que corres-
                                                   ponden al ADN.
                     Materiales
                                                6.  Coloca algunas de estas fi bras sobre un portaobjetos. Añade 1 gota
                     ■  1 licuadora                de naranja de acridina y espera 3 minutos. Elimina el exceso de colo-
                     ■  1 embudo                   rante con un pedazo de papel absorbente. Cubre la muestra con una
                     ■  1 pipeta de 10 mL          laminilla y observa a través del microscopio con el objetivo de 100 de
                                                   aumento. Describe tus observaciones.
                     ■  1 agitador
                     ■  2 vasos de precipitados                          Extremo 3’  Extremo 5’
                       de 250 mL                                         a                                  b
                     ■  1 trozo de tela, gasa o
                       papel fi ltro
                     ■  1 probeta de 100 mL
                     ■  1 microscopio
                     ■  Arena lavada
                                                                            A   T  C
                     ■  Portaobjetos y                                       G  T  C  A  G
                       cubreobjetos
                     ■  Papel absorbente




                     Análisis de resultados
                  1.  ¿Para qué se licúa el hígado de pollo?
                  2.  ¿Qué función cumple el cloruro de sodio?
                  3.  ¿Cuál es la función del SDS o del detergente?
                                                                          Extremo 5’  Extremo 3’
                  4.  ¿Qué diferencias existen entre el ADN y el ARN?

          264   © Santillana





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