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DIFRACCIÓN DE LA LUZ 639

primer haz difractado (K =1) cuando hay interpuesto entre objeto y objetivo un medio de índice
de refracción n, es (fórmula 14): nd sen j =l; se ha multiplicado el camino geométrico (d sen j)
por n para obtener el camino óptico. La fórmula del poder separador es, por lo tanto:

1 n sen j
p = =
d l
análoga a la (13) salvo en el factor 0,61 del denominador.
Para evitar la formación de imágenes falsas, basta iluminar con foco extenso, es decir, que
cada punto del objeto reciba luz de puntos luminosos distintos; ello se consigue con un «condensa-
dor» que forma una imagen del foco extenso sobre el propio objeto.

XXVI – 43. Microscopio de contraste de fase*
El microscopio de contraste (Zernike-1935), resuelve el problema de observar, a través de un
microscopio, a corpúsculos transparentes que al no producir cambios en la intensidad y el color de
la luz, no se hacen visibles por los métodos usuales de iluminación y preparación, requiriéndose,
en las técnicas más comunes, el teñido de las preparaciones con el peligro de reacciones químicas
y muerte de las células vivas. Fig. XXVI-54.– Iluminación por el sis-
tema Köhler.
MUESTRA PARA EXAMEN. PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN. COPYRIGHT EDITORIAL TÉBAR
La iluminación se realiza por el sistema de Köhler, recibiendo la preparación un haz de rayos
paralelos, cuyas ondas están en fase; al ser el índice de refracción del corpúsculo algo mayor, por
ejemplo, que el del medio, la luz que atraviesa aquél se retrasa en fase, con respecto a la luz que
no lo atraviesa, originándose, además, a partir del corpúsculo una débil luz difractada en todas las
direcciones. La Fig. XXVI-54 nos da una idea del fenómeno.
El retraso de fase queda representado en la Fig. XXVI-55, que en definitiva es como una foto-
grafía de las ondas en un determinado instante. En abcisas se representa la distancia a un origen y
en ordenadas la elongación, x.
Observemos que la onda C, se puede obtener a partir de la B, sumando a sus elongaciones las
de D, que nos representa la luz difractada, la cual está desfasada p/2 con respecto a B.
Si A y A son respectivamente las amplitudes de luz directa y la difractada (Fig. XXVI-56-1ª),
1
2
por estar desfasados en p/2 la amplitud resultante es:
A 2 =A 1 2 +A 2 2 ; A 1 2 Fig. XXVI-55.– Representación del
retraso de fase.
prácticamente igual a A 1 2 (la luz difractada es de pequeña intensidad). La luz que atraviesa al
corpúsculo tiene por tanto una intensidad prácticamente igual a la que no lo atraviesa y el corpús-
culo no se hace visible por la falta de contraste.
Si por algún procedimiento conseguimos retrasar p/2 ó 3p/2 a la luz directa se verifica (Fig.
XXVI-56 2ª y 3ª):
A = A + A 2 A 2 = A 2 1 + A 2 2 +2 A A 2
1
1
o bien: A = A - A 2 A 2 = A 2 1 + A 2 2 -2 A A 2
1
1
2
El término 2A A ya no es despreciable frente a A ; y despreciando, como hicimos antes, a
1
1
2
A 2 2 obtenemos en definitiva:
2 2
A = A + 2 A A 2
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2
2
o bien: A = A - 2 A A 2 Fig. XXVI-56.– A y A son respecti-
2
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1
vamente las amplitudes de la luz di-
En el primer caso la intensidad luminosa de la luz que ha atravesado al corpúsculo es mayor recta y difractada.
que la de la zona que le rodea o menor en el segundo caso, estableciéndose el contraste y hacién-
dose visible la partícula.
Para realizar el retraso en fase de p/2 ó 3p/2, se emplean láminas cuyo espesor e, se relaciona
con su índice de refracción y la longitud de onda de la luz, por las expresiones:
e (n – 1) =l/4 (15)
3l
(lámina cuarto de onda); o bien: en( -1 ) =
4
2p
En efecto: si el estado vibratorio de la radiación al llegar a un cierto punto es: x = A sen t
T
F t e I
después de atravesar una capa e de aire es: x ¢ = A sen 2p G - J
H T K l
* Este párrafo es un extracto del trabajo Métodos modernos de microscopía del Dr. D. Justiniano Casas. (Arbor, núm. 99).